南宮娛樂生物

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    南宮娛樂優勢
    • 質量保證 :如無特殊要求南宮娛樂將提供至少1 ml含107-108病毒顆粒的病毒液 。
    • 去除了病毒的關鍵蛋白 ,對人體安全 ;屬於複製缺陷型病毒 ,不會產生下一代病毒顆粒 ;已被改造為自身失活型 ,病毒轉導並整合到細胞後不再具有產生具有包裝能力的病毒 。可根據需要選擇組織特異性或細胞特異性啟動子


    原理

    慢病毒係統是理想的可以在多種細胞類型(如原代細胞 、幹細胞和非分裂細胞)中實現可重複的穩定表達的基因表達工具 。對於難轉染的細胞而言 ,采用病毒遞送外源基因的方式是非常有效的選擇 。慢病毒通過順式作用元件將病毒運送到細胞核 ,並將要表達的基因序列整合到細胞的基因組中 。采用慢病毒可以得到持續穩定的高表達 。采用慢病毒係統進行高滴度的複製缺陷型慢病毒顆粒的生產 ,從而可以有效轉導幾乎所有分裂和非分裂細胞類型 。

    服務流程

    1.客戶提供 :含有目標基因的質粒(提供測序圖譜)或所要表達的目的基因的名稱 ,序列 ;所需要的病毒滴度及總量 ,病毒是否需要純化 ;若需要檢測外源基因的表達 ,如需要請提供相應的抗體

    2.含目的基因的慢病毒載體的構建和純化提取

    3.慢病毒表達載體 、pGag/Pol 、pRev 、pVSV-G四質粒共轉染293T細胞 ;

    4.培養48-72h ,收集培養上清 ;

    5.病毒的純化和濃縮 ;

    6.滴度測定 、目的基因檢定

    7.將製得的慢病毒液轉導客戶的靶細胞 ,篩選混合穩定細胞株 ,並檢測靶基因的表達 。

    8.南宮娛樂提供 :提供重組後的慢病毒載體質粒 ,並附上對目的基因的PCR鑒定結果 ;提供已測定好滴度 、可以直接進行後續分析的慢病毒儲存液


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