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    原代細胞永生化
    正常組織來源的細胞在通常的體外培養條件下可生長和分裂 ,但經過有限次的細胞傳代後 ,就會停止增殖 ,發生衰老和死亡 。這就限製了細胞培養技術的進一步應用 。細胞永生化(cell immortalization)指體外培養的細胞經過自發的或受外界因素的影響從增殖衰老危機中逃離 ,從而具有無限增殖能力的過程 。
    通過基因轉染等技術將外源性永生化基因,如病毒 、原癌基因和抑癌基因突變體等 ,導入目的細胞內 ,以增加永生化的發生率 ,進而建立永生化細胞株(immortalized cell strains) ,以達到使體外培養的細胞具有無限增殖能力且細胞間無差異的目的 。
    成功案例

    人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)

    人子宮內膜間質細胞

    小鼠腎成纖維細胞

    小鼠肝星狀細胞

    小鼠支氣管上皮細胞

    小鼠心肌細胞

    大鼠肝星狀細胞

    大鼠心肌成纖維細胞

    大鼠心肌細胞

    大鼠胰腺星狀細胞

    大鼠血管平滑肌細胞(VSMC)

    大鼠星狀膠質細胞

    可選方法
    SV40 Large T ,hTERT ,cdk4 ,myc

    可選方法

    參考文獻

    1.KATAKURA Y, ALAM S, SHIRAHATA S. Immortalization by gene transfection[J]. Methods in Cell Biology, 1998, 57: 69-91

    2.FURUKAWA T, DUGUID W P, ROSENBERG L, et al. Long-term culture and immortalization of epithelial cells from normal adult human pancreatic duct transfected by the E6 E7 gene of human papillomavirus 16[J]. American Journal of Pathology, 1996, 148(6): 1763-1770

    3.DICKSON M A, HAHN W C, INO Y, et al. Human keratinocytes that express hTERT and also bypass a p16(INK4a) enforced mechanism that limits life span become immortal yetretain normal growth and differentiation characteristics [J]. Methods in Cell Biology, 2000, 20(4): 1436-1447.

    4.BODNAR A G, OUELLETTE M, FROLKIS M, et al. Extension of lifespan by introduction of telomerase into normal human cells[J]. Science, 1998, 279(5349): 349-352.

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