目前 ，缺血再灌注損傷發生的機製尚未完全闡明 ，研究表明自由基 、鈣超載 、心肌纖維能量代謝障礙 、中性粒細胞 、血管內皮細胞 、細胞黏附分子與細胞凋亡等均可能參與缺血再灌注損傷（如下圖所示） 。1）氧自由基（FR）生成 ：再灌注時產生的大量氧自由基不能被清除 ，它可與各種細胞成分 ，如膜磷脂 、蛋白質 、核酸等發生反應 ，造成細胞結構損傷和功能代謝障礙 。冉擘力等從細胞水平證明早期產生的氧自由基能誘導延遲保護作用產生 ，其機製可能是通過早期氧化反應一方麵改變SOD形態結構而提高酶的活性 ，誘導延遲相SOD合成增加 ，另一方麵誘導熱休克蛋白信使核糖核酸轉錄和持續合成 ，保護心肌細胞對抗細胞外氧自由基的損傷 ；一氧化氮合酶(NOS)產生的一氧化氮能有效對抗氧自由基的損害 ，延遲期心肌NOS活性增加 。2）鈣超載 ：生理狀態下 ，胞漿內鈣濃度約為10-7mol/L，而細胞外及胞漿內的鈣儲存係統（如內質網和線粒體）中鈣濃度為10-3mol/L 。但是再灌注後 ，鈣離子向線粒體轉移 ，導致線粒體功能障礙 ；鈣離子濃度升高 ，可激活多種酶（如激活膜磷脂酶A2） ，同時促使心肌纖維過度收縮 ；通過Na+ /Ca2 +交換形成一過性內向電流 ，在心肌動作電位後形成延遲後除極 ，這是引起心律失常的原因之一 。另外 ，它還促進ATP分解 ，使能量急劇減少等 。3）微血管損傷和白細胞激活 ：正常情況下 ，中性粒細胞與血管內皮細胞的相互作用受內皮細胞上的陰性糖苷及內皮細胞產生的眾多抗炎因子的抑製 ，中性粒細胞處於靜止狀態 。缺血時 ，激活的中性粒細胞與血管內皮細胞發生固定粘附 ，導致微血管機械阻塞 ，並可釋放出大量的炎性介質 ，不但可改變自身的結構和功能 ，而且使周圍組織細胞受到損傷 ，發生無複流現象 ，致使細胞發生不可逆性損傷和壞死 ，即再灌流性心肌損傷 。

南宮娛樂已經建立了心肌細胞缺氧複氧損傷模型 ，根據造成缺氧的原理可分為物理方法和化學方法 。物理性缺氧法 ，即是將培養的心肌細胞 ，洗淨舊培養基 ，給予預先排除氧氣的無糖培養基 ，置密閉盒中持續通以95%N2+5%CO2混合氣 ，通氣15分鍾後 ，密閉缺氧盒 ；4小時後打開缺氧盒 ，取出培養板 ，換為DMEM培養基繼續培養。化學性缺氧法 ，即是在培養基質中加入化學物質 ，導致培養細胞缺氧的方法 。常用的化學物質主要有氯化鈷和連二亞硫酸鈉 。同時 ，南宮娛樂選擇合適的檢測指標來評估和調整相關參數（如細胞密度 、藥物濃度 、藥物處理時間等） 。根據目的不同 ，所選擇的指標也不同 ，如反映細胞狀態可直接在顯微鏡下觀察，反映細胞活力可以用MTT法直接檢測 ，反映細胞破損可用試劑盒檢測細胞上清中的LDH或細胞內的MDA ，反映細胞凋亡可用熒光染料檢測 。下圖顯示的是 ，利用JC-1染料評價心肌細胞線粒體膜電勢在缺氧複氧損傷時的變化（LC代表某種藥物） 。